当一种4肽与FDNB反应后,用5.7mol/LHCl水解得到DNP-Val及3种其他氨基酸;当这4肽用胰蛋白酶水解时发现

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  • 分析:FDNB即2,4-二硝基氟苯,在弱碱性溶液中可与肽链N-末端的氨基酸生成黄色的二硝基苯氨基酸(DNP-AA).盐酸水解可以打开所有的肽链,是蛋白质或者多肽变为游离的氨基酸.LiBH4还原羧酸成为醇类,可使C-末端AA还原为相应的氨基醇.胰蛋白酶可专一性水解由碱性氨基酸(lys,Arg)羧基端形成的肽键.

    解题:1.因为FDNB反应后经5.7mol/LHCl水解得到DNP-Val及3种其他氨基酸,所以N-末端是Val.解出:Val·-·-·-.

    2.其中一片用LiBH4还原后再进行酸水解,水解液内有氨基乙醇,Gly是氨基乙酸,因此C-末端是Gly.浓硫酸条件下能与乙醛酸反应产生紫(红)色产物的氨基酸是Trp.解出:Val·-·Trp·Gly

    3.当这4肽用胰蛋白酶水解时发现有两种碎片段,所以水解此肽键-COOH末端是Lys或者Arg.解出:Val·Lys·Trp·Gly或者Val·Arg·Trp·Gly

    答案:Val-Lys或Arg-Trp-Gly