分离定律的实质就是控制仪对相对性状的两个不同的等位基因互相独立、互不沾染,在形成配子时彼此分离,分别进入不同的配子中,结果一半的配子带有一种等位基因,另一半的配子带有另一种等位基因.
那么按照孟德尔的假设,杂合子也就是F1代Cc在产生配子时,可以形成两种分别含有C、c的配子,其比例为1：1.所以只要验证这一点就可以证实分离定律.测交就是用这个杂合子和隐性的纯合子交配,因为隐性纯合子cc只会产生一种配子c,又因其为隐性配子,故它与任何配子结合形成等位基因都会表现出配子的基因型,所以F1测交表现出显性：隐性=1：1,证明了F1的基因型.分离定律得以证实.
这个规律的决定点来自于分子生物学等方面,是由遗传物质的特点决定的,其实如果他选的性状不是不连锁的,他就会发现“规律”不那么准了.