本方法采用乳糖胆盐培养基,是具有选择性作用的培养基.其中胆盐具有抑制革兰氏阳性菌的作用.胆盐的品种来源及用量不同,其抑菌效果也不同.目前国内常见的胆盐有国产的生检7号和3号胆盐,进口的Difco和Oxoid,No.3胆盐,以及牛胆盐、羊胆盐、猪胆盐,免胆盐和家禽胆盐等.
有时因某种胆盐不易购得,需用其他胆盐代替时,应重新测定抑菌的有效剂量,这些情况给使用者带来不便.经实验观察,猪、牛、羊三种胆盐对大肠菌群的检验效果无明显、差异,可互相替代；而其他胆盐的检验效果则不一致.不宜相互代替.在胆盐用量上,实验表明l％、0.5％和0.25％三个剂量间无何差异,所以本方法采用的胆盐剂量（0.5％）是适宜的,在称量时稍有误差,亦不致影响大肠菌群的检出.
（2）乳糖发酵试验
乳糖发酵试验使用乳糖胆盐发酵培养基,细菌分解糖类是依靠细菌细胞所产生的各种酶类的作用,细菌产生的分解糖的酶随细菌种类不同而异,可以此鉴别细菌.
大肠杆菌能分解乳糖而产生酸,使培养基的pH降低（指示剂变色）.这一现象可作为观察结果的指标.大肠杆菌细胞在酸性环境中,由于甲酸脱氢酶的作用,可使甲酸分解成C02和H2,在培养基中产生大量气体而进入倒管中,以观察产气.
对这种产气量小或倒管内虽无气泡,糊液面及管壁可看到缓缓上浮的小气泡的情况时,均应作进一步观察与鉴别.