DNA连接的反应温度为什么采用16摄氏度

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温度过高,虽然酶反应速度快,但是连接-断开是双向的,动态平衡,可能由于热运动的关系,断开速度也快,温度过低,连接速度太慢.所以折中一下,选16度.不过在具体实验中,4度过夜也是有很高的连接效率,一些公司的连接酶,比如invitrogen,据说可以37度五分钟达到95%的连接效率.关于连接酶具体的机理,你可以到ncbi上查查文献.