往简单讲,切割就是看着酶的名字,找到对应点,然后把圈圈拉开来,连接就是在对应位置把它再装回去
1.目的基因-载体连接物 载体-载体连接物 目的基因-目的基因连接物
筛选
这个很简单,理解起来应该没问题
2.“用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验”就是目的基因载入宿主细胞,并表达的过程
目的基因-目的基因连接物,本身连四环素抗性基因都没有,更别说表达了,死掉
目的基因-载体连接物,因为酶切位点破坏了四环素抗性基因,所以得不到表达,也死掉
载体-载体连接物,四环素抗性基因先被破坏,有连上了,能表达,所以活着
3.
用两种酶切,即双酶切法
4.目的基因表达就是切好连好了之后把重组质粒放到宿主细胞里,然后转录翻译的过程
在P点（题目里说了P是启动子）