解题思路:基因工程操作的工具是限制性内切酶、DNA连接酶和运载体;基因工程操作的步骤为提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达.目的基因的检测有多种手段,如①DNA分子杂交技术;②分子杂交技术;③抗原-抗体杂交技术.
(1)用限制酶切割DNA后,可能产生黏性末端,也可能产生平口末端.若要在限制酶基因工程中,往往采用同种限制酶切割目的基因和质粒以产生相同的黏性末端,再用DNA连接酶使其直接进行连接.
(2)RNA聚合酶识别和结合的部位是启动子.将目的基因导入微生物细胞时,常用Ca2+处理微生物细胞,使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞,以利于表达载体进入.为了检测目的基因是否转录出了mRNA,可采用分子杂交技术,即用放射性同位素标记的胰岛素基因作探针与mRNA杂交;了检测目的基因转录的mRNA是否翻译成蛋白质,可采抗原--抗体杂交技术.
(3)采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞时,先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中,然后用该农杆菌感染植物细胞,通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的染色体DNA上.
故答案为:
(1)平相同
(2)提供RNA聚合酶特异性识别结合位点,驱动基因转录Ca2+DNA-RNA分子杂交胰岛素原(蛋白质)
(3)T-DNA染色体
点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术;基因工程的应用.
考点点评: 本题考查基因工程的相关知识,只要考生识记基因工程的工具和操作步骤即可正确答题,属于考纲识记层次的考查,此类试题,需要考生在平时的学习过程中学会构建知识网络结构.