解题思路:1、基因工程的基本操作步骤主要包括四步:①目的基因的获取;②基因表达载体的构建(核心);③将目的基因导入受体细胞;④目的基因的检测与表达.
2、植物体细胞杂交的过程:
3、单克隆抗体制备流程:先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应,之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞;诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合,利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞;进行抗体检测,筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞;进行克隆化培养,即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养;最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体.
4、胚胎干细胞的特点:具有胚胎细胞的特性,体积较小,细胞核大,核仁明显;在功能上,具有发育的全能性,可分化为成年动物任何一种组织细胞.另一方面,在体外培养条件下,ES细胞可不断增殖而不发生分化,可进行冷冻保存,也可以进行某些遗传改造.
(1)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建;显微注射法是将目的基因导入动物细胞最有效的方法.
(2)植物体细胞杂交过程有两个关键,一个是在把植物细胞杂交之前,必须去除细胞外的细胞壁,该过程需要用到纤维素酶和果胶酶;另外一个是诱导原生质体的融合,方法包括物理法(离心、振动、电刺激)和化学法(聚乙二醇).
(3)在进行单克隆抗体的生产过程中,要把两种细胞进行融合,一种是在体外能够大量增殖的骨髓瘤细胞,另外一种是B淋巴细胞;诱导该两种细胞融合常用的因素有物理(离心、振动、电刺激)、化学法(聚乙二醇)、生物法(灭活的病毒等).
(4)胚胎干细胞在功能上具有发育的全能性,在体外培养的条件下,可以增殖而不发生分化.
故答案为:
(1)基因表达载体的构建 显微注射技术
(2)去除细胞外的细胞壁 原生质间的融合
(3)B淋巴细胞 灭活的病毒
(4)全能 分化
点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术;动物细胞与组织培养过程.
考点点评: 本题考查基因工程和细胞工程的相关知识,要求考生识记基因工程的操作步骤;识记植物体细胞杂交和单克隆抗体制备的具体过程;识记胚胎干细胞的特点,能结合所学的知识准确答题,属于考纲识记层次的考查.