首先你对模板需要有足够的了解,你使用的限制性内切酶为电视不是在启动子附近时独有的；
然后你对启动子的大小是已知的,PCR产物经过电泳可以知道大致知道大小,经过比较,你能大概判断是否得到了正确的产物；
你还可以设计启动子内部特异的引物和,上下游引物中的一条进行PCR,如果有条带,说明你得到了正确的序列；或者你寻找内部独特的酶,进行酶切验证.
利用LM-PCR获得启动子用连接介导PCR克隆启动子,如何保证开始的限制酶切片段中就包含启动子序列?
首先你对模板需要有足够的了解,你使用的限制性内切酶为电视不是在启动子附近时独有的；
然后你对启动子的大小是已知的,PCR产物经过电泳可以知道大致知道大小,经过比较,你能大概判断是否得到了正确的产物；
你还可以设计启动子内部特异的引物和,上下游引物中的一条进行PCR,如果有条带,说明你得到了正确的序列；或者你寻找内部独特的酶,进行酶切验证.