Question

RNA是如何反转录成cDNA的?过程和原理怎样?

Answer 1

操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水

65C反应10min,冰上放置5min后：这一步是让RNA变性,把RNA的二级结构打开；

再加dNTP,RNaseA,BUFFER,MTV逆转录酶,

反应25℃10min：这一步是让反转录引物（oligodT,随机引物）和模板RNA退火结合

37℃60min：这一步是反转录酶的工作温度

70℃10min：这一步是变性,把合成的cDNA和RNA变性开,就拿到单链的cDNA