如果你是做SDS电泳的话,可以用TBS或者PBS加上0.5% SDS,再加上1mM PMSF,直接去裂解细胞.这个裂解力比较强,一般的细胞都可以裂解完,裂解完后离心,取上清,与蛋白上样缓冲液混合煮一下就可以了.如果是做非变性电泳的话就不能加SDS而可以加NP-40和曲拉通100.(PMFS也得加一点,如果有必要,别的蛋白酶抑制剂也可以加)
不过这样提的都是可溶性蛋白.如果是膜蛋白就比较费事.
hela及CHO细胞怎么提全蛋白?提完后可以直接电泳吗?
如果你是做SDS电泳的话,可以用TBS或者PBS加上0.5% SDS,再加上1mM PMSF,直接去裂解细胞.这个裂解力比较强,一般的细胞都可以裂解完,裂解完后离心,取上清,与蛋白上样缓冲液混合煮一下就可以了.如果是做非变性电泳的话就不能加SDS而可以加NP-40和曲拉通100.(PMFS也得加一点,如果有必要,别的蛋白酶抑制剂也可以加)
不过这样提的都是可溶性蛋白.如果是膜蛋白就比较费事.