解题思路：1、斐林试剂是由甲液（质量浓度为0.1g/mL氢氧化钠溶液）和乙液（质量浓度为0.05 g/mL硫酸铜溶液）组成，用于鉴定还原糖，使用时要将甲液和乙液混合均匀后再加入含样品的试管中，且需水浴加热；双缩脲试剂由A液（质量浓度为0.1 g/mL氢氧化钠溶液）和B液（质量浓度为0.01 g/mL硫酸铜溶液）组成，用于鉴定蛋白质，使用时要先加A液后再加入B液．
2、在探究温度对酶活性影响的实验中，温度是自变量，pH属于无关变量．
3、甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，利用甲基绿和吡罗红混合染色剂对细胞染色，甲基绿能使DNA呈绿色，吡罗红能使RNA呈红色．
4、线粒体需要使用健那绿染色，染成蓝绿色．
5、从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几下，这样使酵母菌分布均匀，防止酵母凝聚沉淀，提高计数的代表性和准确性，求得的培养液中的酵母菌数量误差小．
A、双缩脲试剂由A液（质量浓度为0.1 g/mL氢氧化钠溶液）和B液（质量浓度为0.01 g/mL硫酸铜溶液）组成，用于鉴定蛋白质，使用时要先加A液后再加入B液，A错误；
B、在探究温度对酶活性影响的实验中，只有温度是自变量，B错误；
C、甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，利用甲基绿和吡罗红混合染色剂对细胞染色，可观察DNA和RNA在细胞中的分布，C错误；
D、对培养液中酵母菌计数前，将培养液振荡均匀后再吸取样液，D正确．
故选：D．
点评：
本题考点： 探究培养液中酵母种群数量的动态变化；检测蛋白质的实验；DNA、RNA在细胞中的分布实验；探究影响酶活性的因素．
考点点评： 本题考查观察DNA和RNA在细胞中的分布实验、检测还原糖实验、检测脂肪实验、检测蛋白质的实验、探究影响酶活性的因素、探究培养液中酵母种群数量的动态变化，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的试剂及试剂的作用、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累．