解题思路：细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖．杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体．
两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群．
A、将抗原注入小鼠体内，刺激小鼠体内产生体液免疫，从而获得能产生抗体的B淋巴细胞，故A正确；
B、用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理B淋巴细胞，骨髓瘤细胞能在体外培养条件下无限增殖，所以不需要用胰蛋白酶处理，故B错误；
C、淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合需要灭活的病毒或聚乙二醇或物理因素来诱导，故C正确；
D、由于第一次筛选获得的杂交瘤细胞产生多种抗体，所以需进一步筛选以获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞，再进行克隆化培养后提取单克隆抗体，故D正确．
故选：B．
点评：
本题考点： 单克隆抗体的制备过程．
考点点评： 本题考查单克隆抗体的制备，意在考查考生的识记能力和理解能力，解题的关键是掌握知识点．