光电比色计工作在可见光区,只适合在有限个波长下测量.因此,他不能满足不同分析工作的需要.
为了克服以上不足,便发展了性能更好的分析方法——紫外-可见分光光度法.它利用单色器分光,其单色光纯度高,波长范围宽,并可连续变化,解决了光电比色计存在的问题.
分子吸收光谱与物质本身的结构有关,吸光度的大小与物质的含量有关,我们利用吸收光谱的形状和吸收程度的大小即可对物质进行定性和定量的分析.这种分析方法叫做分光光度法.
一、单光束光学系统：
是分光光度计中最简单的和应用最普遍的一种.它的特点是只有一条光束.通过交换参考和样品的位置,使其分别进入光路.在参考（溶液）进入光路时,调零.然后将样品进入光路的信号自动减去参考的信号,就可以在显示器上读出样品的透过率和吸光度.
单光束分光光度计由于在每个波长都需要变换参考和样品的位置,所以只能手动,不能扫描吸收光谱.因此不适宜用于定性测定,而只能做定量测定用.它的结构比较简单,使用也有一定的限制,但如配置程序控制和打印装置,则对一些常规的定量测定是特别理想的.
二、双光束光学系统：
单光束分光光度计虽简单价宜,但它有缺陷：即它要求在整个测定过程中光源必须稳定不变,并且光电转换器和放大器如有不规则的特性会给测量结果带来误差.
为克服上述缺点,设计了双光束分光光度计.