将植物组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心,是分离细胞器的常用方法.一个颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状、稠密度,也与离心力以及悬浮介质的粘度有关.在一给定的离心场中,同一时间内,密度和大小不同的颗粒其沉降速率不同.依次增加离心力和离心时间,就能够使非均一悬浮液中的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管底部,分批收集即可获得各种亚细胞组分.叶绿体的分离应在等渗溶液(0.35mol/L 氯化钠或0.4mol/L 蔗糖溶液)中进行,以免渗透压的改变使叶绿体受到损伤.将匀浆液在1000 r/min 的条件下离心2min,以去除其中的组织残渣和一些末被破碎的完整细胞.然后在3000 r/min的条件下离心5min,即可获得沉淀的叶绿体(混有部分细胞核).分离过程最好在0～4℃的条件下进行；如果在室温下,要迅速分离和观察
叶绿体分离的实验原理是什么?在分离叶绿体时应注意些什么问题?