关于单酶切,片段和载体在进行单酶切的时候,是不是载体和片段同时要去磷酸化,想请教有做过这方面实验的达人,
3个回答
都去磷酸化就无法重组了(重组实际上是DNA末端形成磷酸二脂键,如果没有磷酸基团,则无法形成二脂键)
应该是只对载体去磷酸化,避免载体自连.
相关问题
处理DNA(包括载体酶切和目的片段获得的片段)后的平滑末端还需要去磷酸化吗?
单酶切连接的问题?我是用XbaI单酶切PMD-19载体,将我的两端都是XbaI酶切位点的pcr产物连接上去,但是做了很久
请问酶切时分别单酶切可以切动,而双酶切结果和单酶切相同,是怎么回事啊?谢谢啦!
双酶切切不开,单酶切正确我现在在构建一个载体,要用到Blp1 、Asc1、还有not1,其中的任意两个进行双酶切,但是用
关于慢病毒载体酶切问题我做慢病毒Psico的双酶切,是两个酶分别切的,为什么酶切产物跑电泳时,条带比没切过的质粒超螺旋位
质粒酶切我最近在做连接,总是连不上,所以我想分析是哪步出问题.我想将酶切完的质粒载体与未酶切的质粒跑电泳看是否酶切成功,
目的片段连接表达载体后酶切出非特异带为什么
pUC克隆载体相邻酶切位点PstI,SalI,XbaI酶切效率如何?
pet30a载体经过NdeI和xhol两个酶双酶切过后的片段大小是多少啊?师兄师姐们帮我啊!
关于PCR产物酶切要构建一个载体目的基因PCR回收后做双酶切应该做多大的体系50 or 100?各种成分为多少?望大家不