引物设计时如何添加酶切位点

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DNA合成,新链的延伸方向是5→3
因此,需要在5端加上酶切位点记得再加上一些保护碱基,因为内切酶除了有特异的识别位点之外,
还需多几个无需特异性的碱基提供一个platform让它可以结合上去,否则会掉下来
保护碱基的具体数目一般5-6个.
引物的结构就应该是（5→3）：保护碱基+酶切位点+原来的引物序列