如何利用基因工程大量合成胰岛素和青霉素?

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  • 合成胰岛素现在用的是大肠杆菌重组工程菌株:胰岛素有两条蛋白链,分别有对应的编码基因,将这些基因采用PCR策略克隆获得,将两个基因分别插入到表达载体中,然后分别转化进入大肠杆菌,获得两个分别编码胰岛素蛋白链的大肠杆菌,这两个大肠杆菌诱导条件下产生大量胰岛素的两条链,分离纯化这两种蛋白质,然后在促使二硫键产生的条件下,将两条肽链进行连接,产生具有活性的胰岛素.要提高胰岛素的产量,就必须提高表达载体的启动子活性,一般采用的强启动子活性,另外对编码人的胰岛素基因进行改造,使得符合大肠杆菌的密码子偏爱性.

    青霉素工业上采用的产黄青霉工业菌株来生产.提高产量的基因工程策略是:

    1、青霉素是在不同酶催化下产生的次级代谢物,不像胰岛素本身就是基因编码产生的,因此不能采用上述的方法.一般是克隆青霉素合成过程中的关键酶,提高这些关键酶的基因表达活性来提高青霉素产量.2、引入一些新的基因,如扩环酶基因等来提高青霉素的产量.