二次PCR产物,电泳条带与第一次PCR一样不明显,如何解决

3个回答

  • 首先你的确认你没有用错东西.

    如果没有问题,二次PCR的话,那得看你的延伸时间和退火温度了.

    2轮的退火温度最好调高些,以增强特异性.

    延伸时间上,看你的产物大小.如果需要大条带,那延伸时间意义不大,最好能对一轮产物进行预期条带的回收后再做2轮,或者进行巢式PCR；要是需要小条带那就简单了,直接缩短延伸时间就好了.

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