用基因工程生产干扰素的具体过程我得写一篇论文,要越长越好,应该怎么具体化呢,而且要正确啊

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  • 1. 设计合成干扰素基因的两端引物(完全的),每条引物内或5'-端最好有内切酶酶切位点.

    2. 有药物诱导细胞,如佛波酯,使细胞表达干扰素升高.

    3. 破碎细胞,提取细胞总mRNA.

    4. 用逆转录试剂盒逆转录,把总mRNA逆转录成cDNA

    5. 以cDNA为模板、干扰素引物为引物,PCR,得到完全的干扰素基因的PCR产物

    6. 提取载体(质粒、病毒等),双酶切,再把干扰素基因的PCR产物用相应的酶酶切,用连接酶连接

    7.连接完成后分离纯化,测序,与原干扰素序列比对.

    8.鉴定序列无误后(无义突变也行),导入受体细胞,筛选

    9.筛选出来后,提取重组产生的干扰素,活性测定

    10.有活性再扩大规模培养,提取生产

    你不做干脆请写手帮着写得了!几千就解决问题