印迹法(blotting)即转移电泳,是20世纪70年代发展起来的一种新方法.Southern于1975年建立了检测特异DNA片段的DNA-RNA杂交法,称作Southern印迹法.1977年Alwine等把此方法应用到RNA的研究方面,称作Nouthern印迹法.1979年Towbin等则把该方法扩展应用到蛋白质分析方面,称作Western印迹法.1982年Reinhart报道的双向蛋白质印迹法,称作Eastern印迹法.目前,有人把Southern,Nouthern,Western印迹法分别称作DNA印迹法,RNA印迹法和蛋白质印迹法.而每一种印迹法又可以分为斑点印迹法和电泳转移印迹法.
印迹法的应用
(一)分析和制备特异成分一般生命大分子如蛋白质等的粗制品经过凝胶电泳后,常常产生许多谱带.但它再经印迹转移程序分析后,就可以从中找出所需的某一特殊成分,而这种特殊成分又可以从相应的凝胶区段回收.用此方法得到的物质纯度较高,纯化步骤也较简单.
(二)检测生命大分子之间的相互作用
不同生命大分子之间的相互作用是经常发生的,特别是在有机体内.因此,建立一种检测生命大分子物质之间相互作用的有效方法一直是人们研究的重要
课题.而用印迹法就可以检测出如DNA-RNA、DNA-蛋白质、RNA-蛋白质、酶—底物、糖蛋白—凝集素、激素—受体等物质之间的相互作用,同时也可
用此方法寻找各种大分子物质的相应配体.