你这个实验应该是从转化以后再开始的吧,
制备蓝白筛选的平板,一般的T载体我们都会选择氨苄抗性的板子来涂平板,因为氨苄的比卡那的板子好长,因为你是PCR扩增出来的,所以推荐你使用大号的平板以获取更多的菌落,将IPTG（1mol/L浓度）取4-8微升,取用二甲基甲酰胺溶解的浓度为100微摩尔每升的X-Gal,50-80微升,将两者混匀之后均匀得涂到含有氨苄抗生素的大平板上,在暗处晾干之后将转化后的菌液全涂到平板上,过夜培养.次日就会发现平板上会长出菌落,有蓝色和白色的菌落,取白颜色的菌落接种,过夜培养,然后提取质粒进行测序.注意有一种情况,会看到有浅蓝色的菌落,这样的菌落是因为转化进的片段比较小造成的,这种菌落也不是阳性的.只有白颜色的是阳性菌落.