4、诱导细胞融合的方法有哪些?

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  • (1)物理融合的机制

    20世纪80年代发明了电融合技术.此方法是先将两种原生质体以适当的比例制成细胞悬液,将其滴入电融合小室中,给小室两极以交变电流,使原生质体沿电场方向聚集成串珠状,接着给以瞬间高强度的电脉冲,使原生质体膜产生局部破损而融合.

    (2)化学融合的机制

    现通常使用聚乙二醇(PEG)作为融合剂.PEG可以破环细胞间相互排斥的表面作用力,从而使相邻细胞聚集而促进融合.另外,化学融合方法还有高pH高Ca2+法,其基本原理是中和原生质体表面所带电荷,使原生质体的质膜紧密接触,从而有利于质膜的接触融合.

    (3)灭火病毒诱导的细胞融合的机制

    此方法适用于动物细胞的融合.通常使用灭火的仙台病毒.利用灭火的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合.在诱导细胞发生融合前,必须先用紫外线将病毒灭火,再稀释到一定浓度后加入到细胞悬液中诱导细胞融合.