解题思路：DNA连接酶和DNA聚合酶的区别：
①DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键；
②DNA连接酶是同时连接双链的切口，而DNA聚合酶只是在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来．
目的基因分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．
A、人的胰岛素基因在细胞核中，因此转录发生在细胞核中，而翻译发生在细胞质中的核糖体上，A错误；
B、DNA连接酶能够两个DNA片段之间的磷酸二酯键，B正确；
C、通过检测，大肠杆菌中没有胰岛素产生只能确定目的基因没有翻译成蛋白质，不能判断重组质粒未导入受体菌，C错误；
D、获得目的基因的工具酶有限制性核酸内切酶和DNA连接酶，D错误．
故选：B．
点评：
本题考点： 基因工程的应用．
考点点评： 本题难度适中，属于考纲中识记层次的要求，考查了基因表达的场所、基因工程的操作工具及作用部位等知识，解题关键是考生能够区分DNA连接酶和DNA聚合酶的区别并加以识记．