你有没有可以用的阳性对照?先扩增一下以确定你的PCR没有问题,如果没有阳性对照,建议你直接把能换的试剂都换了吧,尤其是模板和引物,引物看看设计有没有问题,模板重新制备,还有PCRbuffer,看看是不是含有Mg2+ 的,如果不含是需要另外添加的,更换以后你也不需要做什么温度梯度,直接做个touchdown吧,touchdown做完能出来就出来了,出不来肯定你温度梯度也出不来
PCR怎么目的条带老不出,求大虾帮忙看下图~
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