革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师、细菌学家 Christain Gram创立.
操作流程
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是：
（1）载玻片固定.在无菌操作条件下,用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀,在火焰上加热以杀死菌种并使其粘附固定.
（2）草酸铵结晶紫染1分钟.
（3）自来水冲洗,去掉浮色.
（4) 用碘-碘化钾溶液媒染1分钟,倾去多余溶液.
（5）用中性脱色剂如乙醇（95%）或丙酮酸脱色30秒,革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色,革兰氏阴性菌被褪色而呈无色.
（6）用蕃红染液复染30秒,革兰氏阳性菌仍呈紫色,革兰氏阴性菌则呈现红色.革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌即被区别开.
染色原理
G﹢菌：细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性屏障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔障缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上.呈紫色.
Gˉ菌：肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,番红染液复染后呈红色.