质粒自连说明双酶切没有切开.
不知道你的buffer是怎么选的,如果两种酶在buffer中的活性不同的话,活性较低的那个可以加大酶量,同时延长酶切时间,或者更换buffer.
条件需要自己摸索.
用fermentas的Kpn1和bamH1做双酶切,用的buffer是Buffer bamH1,做了几次都是质粒自连,怎
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