材料和方法 基因股票和成长情况 有一例外,所有基因股票被描述在本文里是 哥伦比亚背景.T-DNA 插入SALK_035860 被获得了 从Arabidopsis 生物资源中心.插入 FLAG_173C12 被获得了从FST 项目和被描绘了 在Ws 基因背景中.植物homozygous 为这些插入是 由PCR 辨认使用等位基因具体底漆.种子增长 Metromix 200 (Scotts) 并且离开在4.C 冷室2 天在调动之前 对成长分庭.植物年龄被计量从时间种子是 转移到成长分庭.为显形分析,植物是 增长在96-well 舱内甲板在连续的荧光灯之下(100 E/minute/m2; Sylvania VHO) 在22.C .离开轴心的trichomes 被计分了2 几星期在种植以stereomicroscope 以后.开花的时间代表 第一开放花的出现.
核糖核酸污点 总核糖核酸被隔绝了使用Trizol (Invitrogen) 从植物射击尖顶 增长在短天之下适应(10 个小时light:14 小时黑暗) 在22.C .整体幼木(包括盾状体) 被使用了为8 对14 天 幼木、盾状体和叶子1 和2 从植物被去除了 收获在18-21 天在种植以后(dap),和盾状体之间和 叶子1-4 从植物被去除了被收获在23-28 之间dap .叶子的数字当前在射击尖顶由比较确定了 与成长曲线由解剖引起射击尖顶增长在之下 同样SD 情况.测量SPL3mRNA,
20总核糖核酸g 跑了 在1.2% agarose 胶凝体,转移到Hybond N+ 尼龙膜 (Amersham Pharmacia),和交互相联在紫外光之下.杂交 执行了在68.C 在PerfectHyb 加上缓冲(斯格码) .
从SPL3 DNA 克隆和被标记了与32P-dCTP 使用头等II 任意底漆标记的成套工具(Stratagene) .污点杂交了8 个小时 在68.C,污点是 杂交与miR156 补全低聚核苷酸被标记与32PATP (新英格兰Biolabs) 在40.C 在ULTRAhyb-oligo 杂交.
总核糖核酸与叶子或花卉组织如上所述被隔绝了.