牛胰岛素一级结构的测定方法Sanger用来测定牛胰岛素的一级结构的主要方法是什么?

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  • 就是将氨基酸从氨基端开始利用氨基很容易和2,4-二硝基氟氯苯(DNP)发生芳香亲核取代反应,如用一个肽和2,4-二硝基氟苯反应,显然键的N-端游离氨基和它反应,然后把这个N-端带有2,4-二硝基苯基的肽链彻底水解,在水解物中,只有一个氨基酸的α-氨基的氢被DNP取代,各种氨基酸的DNP标记化合物都是黄色的,并且都各有一个Rf值,因此很容易鉴别;所以通过这个方法,很容易辨认出肽中的N-端是哪一个氨基酸.