怎么证明蛋白质合成N端到C端?

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  • 大学生物学书上有证明的.

    见生物化学(下册)王镜岩主编第528页.

    是Dintzis等人用3H-亮氨酸作标记分析了兔网织红细胞无细胞体系中血红蛋白生物合成的过程来证明的.血红蛋白中含有较多亮氨酸.其氨基酸序列为已知.合成反应在较低温度(15度)中进行,以降低合成速度.在反应开始后的4-60分钟内,每隔一定时间取样分析.将带有标记的蛋白质分离出来,用胰蛋白酶水解肽链,用纸层析法分离水解碎片并测定所含放射性强度.从实验结果中发现,反应4分钟后,只有竣基端含有3H-亮氨酸.随着反应时间的延长,带有标记的肽段自羧基向N端延伸,到60min时,几乎整个肽断都布满了标记物.这个实验说明多肽链的合成是从N端向C端进行的