4(G+C)+2(A+T) 是对Tm的一个近似估算值,里面的ACGT是指相应碱基的个数.
所以只知道GC含量40%是不能估算的.可以考虑一下,一条18bp的引物和一条24bp的引物,GC含量一样的话,后者因为碱基多,配对氢键多,相应的Tm也会较高