(1)经限制性核酸内切酶切割后能形成两种类型的末端,即平末端和黏性末端.
(2)为了便于相连,两种不同限制酶切割之后所产生的黏性末端必须相同.
(3)DNA连接酶分为两类:E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶.这二者都能连接黏性末端,此外T4DNA连接酶还可以连接平末端,但连接平末端时的效率比较低.
(4)反转录是以mRNA为模板逆转录先合成单链DNA,再合成双链DNA,利用PCR技术进行大量扩增.
(5)基因工程常用的运载体:质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒.
(6)当受体细胞是细菌时,为了增大导入的成功率,常用Ca2+处理,得到感受态细胞,此时细胞壁和细胞膜的通透性增大,容易吸收重组质粒.未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱.
故答案为:
(1)黏性末端平末端
(2)切割产生的DNA片段末端与EcoRI切割产生的相同
(3)大肠杆菌T4
(4)mRNA(或RNA)cDNA(或DNA)PCR
(5)噬菌体动植物病毒
(6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱