1 首先确定你的测序片段是否会产生高级结构.
2 在测序时候请注明是RNAi载体,可能会出现二级结构,测序公司一般会改变测序策略来解决产生二级结构的问题.
3 看看你的片段和载体是否有反相互补结构.
4 变性后的退火要缓慢退火,降温不能过快,否则会产生意想不到的结构.
1 首先确定你的测序片段是否会产生高级结构.
2 在测序时候请注明是RNAi载体,可能会出现二级结构,测序公司一般会改变测序策略来解决产生二级结构的问题.
3 看看你的片段和载体是否有反相互补结构.
4 变性后的退火要缓慢退火,降温不能过快,否则会产生意想不到的结构.