PCR-DGGE分析真菌多样性,采用巢式PCR扩增,请问第一次PCR产物需要经过纯化后才能进行第二次PCR吗

2个回答

  • 第一次产物是不必要纯化的.之所以要做巢式,就是因为第一次的产物量很少或者扩增的条件不优化.属于一个优化实验条件的步骤.

    你可以做一个系列稀释,比如你第二次飞反应体积是20微升,可以不稀释,直接加1微升第一次反应的产物.其他的管子可以进行系列稀释,根据结果再做调整.

    最优条件有可能要反复几次才能得到

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