乳糖酶制备
采用甲苯破壁方法 制备粗酶液,取4.0ml发酵液,7000r/min离心5min,倾去上清液,向沉淀加入0.1mol/L KH2PO4缓冲液 （pH7.3,含0.15mmol/L MnCl2）至4.0ml,加入40μl甲苯,混匀2min,于40℃,150r/min摇床振荡破壁〔2〕即得本试验用粗乳糖酶.
试剂1.LB 液体培养基
胰蛋白胨10g/L,酵母浸膏5g/L,NaCl 10g/L,用NaOH调节至pH7.5,高压灭菌.
2.TEG缓冲液
称取0.3g Tris加入0.1mol/L HCl溶液14.6ml,先配制成pH8.0 Tris-HCl缓冲液100ml,再加入0.37g EDTA－Na2·2H2O和0.99g葡萄糖,临用前加入400mg溶菌酶.