解题思路:分析表格:限制酶Sma I的识别序列是CCCGGG,在C和G之间切割;限制酶Xma I的识别序列是CCCGGG,在第一个C和第二个C之间切割.
分析图1、图2:质粒只有EcoR I酶和Pst I酶的识别位点,外源DNA分子含有Mse I酶、EcoR I酶和Pst I酶识别位点,且切割获得目的基因需要Mse I酶和Pst I酶.
分析图3:质粒上含有两个抗性基因,即四环素抗性基因和青霉素抗性基因.对质粒进行改造时,已将青霉素抗性基因破坏,所以含重组质粒的大肠杆菌能在含有四环素的培养基上生存,但在含有青霉素的培养基上不能生存.
(1)限制酶Sma I的识别序列是CCCGGG,在C和G之间切割;限制酶Xma I的识别序列是CCCGGG,在第一个C和第二个C之间切割.由此可见,这两种酶的识别的序列相同,但切割位点不同.
(2)因为CG碱基对间有三个氢键,而AT碱基对间有两个氢键,可见AT碱基对间氢键数少,这使DNA双链解旋更容易,所以复制原点的碱基序列特点通常含A、T碱基较多.
(3)图中质粒只有EcoR I酶和Pst I酶的识别位点,而切割目的基因需要Mse I酶和Pst I酶,所以需要对质粒进行改造,在质粒上构建新的限制酶切位点,即Mse I酶切位点.首先用EcoR I酶处理质粒;然后用DNA聚合酶等处理质粒;再运用DNA连接酶处理质粒,从而形成新的限制酶切位点,即可被Mse I酶识别.
(4)由图可知,质粒上含有两个抗性基因,即四环素抗性基因和青霉素抗性基因.对质粒进行改造时,已将青霉素抗性基因破坏,所以含重组质粒的大肠杆菌能在含有四环素的培养基上生存,但在含有青霉素的培养基上不能生存.所以图中培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基A和培养基B分别还含有四环素和青霉素,在含有四环素的培养基上能生存,在含有青霉素的培养基上不能生存的4和6菌落就是含有目的基因的菌落.
故答案:(1)识别的序列相同 催化反应的结果却不同(切割位点不同)
(2)AT碱基对间氢键数少,使DNA双链解旋更容易
(3)EcoRI DNA连接 MseI
(4)四环素 青霉素(青霉素和四环素) 4和6
点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.
考点点评: 本题结合图表,考查基因工程的相关知识,意在考查考生分析图表获取有效信息的能力;理解所学知识要点,把握知识间内在联系的能力;能运用所学知识与观点,通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理,做出合理的判断或得出正确的结论.